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大花萱草，又名金針花、忘憂草，屬百合科萱草屬多年生草本植物，是人工誘導(dǎo)培育成功的多倍體植株，廣泛栽種，是優(yōu)良的園林宿根花卉，是園林布置的重要材料，是高寒地區(qū)園林綠化重要種類(lèi)之一，現(xiàn)被全世界廣為栽植。目前對(duì)大花萱草繁殖方法研究多集中于分株與栽培。播種繁殖是目前應(yīng)用最為廣泛的。但由于其自然結(jié)實(shí)率低，大部分品種還不易結(jié)實(shí)，且有繁殖時(shí)間長(zhǎng)，植株長(zhǎng)勢(shì)不一致。因此，本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)大花萱草分株繁殖和組培研究，得出一套大花萱草快繁方法，指導(dǎo)在北方地區(qū)引種生產(chǎn)與應(yīng)用，從而使大花萱草在北方園林綠地中發(fā)揮更大作用。在結(jié)果中，認(rèn)為分株和組培均可達(dá)到繁殖要求，但組培要求過(guò)高，實(shí)驗(yàn)儀器精密，需要專(zhuān)業(yè)人員操作，而且耗費(fèi)太大。對(duì)于一些稀有品種或結(jié)實(shí)率不高的品種，可以采用組培達(dá)到目的，以保存物種；對(duì)于普通品種，分株即可達(dá)到擴(kuò)繁目的。
【關(guān)鍵詞】大花萱草；擴(kuò)繁；分株；組織培養(yǎng)
0 前言
1）大花萱草無(wú)性繁殖技術(shù)研究狀況
�。�1）大花萱草簡(jiǎn)介
大花萱草根分為肉質(zhì)根和須根，肉質(zhì)根呈紡錘狀，須根多生長(zhǎng)在肉質(zhì)根上。具短根狀莖，葉翠綠狹長(zhǎng)，基生呈帶狀排成兩列�；ㄌ闹胁砍槌�，螺旋狀聚傘花序，每個(gè)花絮可著花數(shù)十朵�；ɡ偎启�，開(kāi)如漏斗，裂片翻卷，為百合形花冠，花瓣先端裂開(kāi)�；ū换亢仙释矤�，雄蕊6枚，3長(zhǎng)3短，花藥呈丁字形背著在花絲頂端，除藍(lán)色和純白色以外其余花色均有栽培品種�；◤阶兓螅ㄐ胃鳟�，花期從晚春一直到秋季。大多數(shù)品種的花只開(kāi)一天，但盛花期可以延續(xù)幾周甚至幾個(gè)月，有些品種單花壽命可超過(guò)24小時(shí)。蒴果，黑褐色、多棱形、有光澤，自然結(jié)實(shí)率低，但大部分品種不結(jié)實(shí)。
大花萱草抗旱能力強(qiáng)，耐高溫，抗低寒，適應(yīng)溫度范圍廣，在我國(guó)從南到北均可種植�？共⌒詮�(qiáng)，對(duì)土壤的適應(yīng)性廣，除過(guò)酸、過(guò)堿、過(guò)沙、過(guò)粘的土壤外一般都能栽培，PH值以6.5至7.5之間為好。
該類(lèi)花卉對(duì)堿性土具有特別的耐性，是油田及灘涂地帶不可多得的綠化材料�？捎脕�(lái)布置各式花壇、馬路隔離帶、疏林草坡等。亦可利用其矮生特性做地被植物。其中有數(shù)個(gè)品種為“冬青”型，種植在南國(guó)，可四季常綠，是優(yōu)秀的園林綠地花卉。
�。�2）繁殖方法
分株分割萱草叢塊是最常用的繁殖方法。該方法操作簡(jiǎn)單，植株容易存活，長(zhǎng)勢(shì)比較一致。分株可將母株叢全部挖出，重新分栽；或者是由母株叢一側(cè)挖出一部分植株做種苗，留下的繼續(xù)生長(zhǎng)。
分株多在春季萌芽前或秋季落葉后進(jìn)行。春季分株移栽，當(dāng)年即可抽苔開(kāi)花；秋季分株移栽，翌年才能抽苔開(kāi)花。移栽時(shí)應(yīng)選用生長(zhǎng)旺盛、花蕾多、品質(zhì)好、無(wú)病蟲(chóng)害的植株。
分株時(shí)挖取株叢的一部分分蘗作為種苗，挖取部分要帶根，從短縮莖處割開(kāi)，將老根、朽根和病根剪除，盡量保留肉質(zhì)根，適當(dāng)剪短（約留10厘米）后即可栽植。栽植應(yīng)選在晴天進(jìn)行，邊挖苗，邊分苗，邊栽苗，盡量少傷根，這樣緩苗快。一般2-3年分株一次，以保證植株旺盛的生長(zhǎng)勢(shì)。
組培用幼嫩葉片、花絲和花苔等器官培養(yǎng)成植株。方法是先誘導(dǎo)幼嫩器官產(chǎn)生愈傷組織，然后用適當(dāng)培養(yǎng)基在適宜的溫濕光氣等條件下培養(yǎng)成幼小植株。再將小苗假植于營(yíng)養(yǎng)缽，經(jīng)一段時(shí)間培養(yǎng)成植株幼苗，之后定植。但這種方法還沒(méi)有被廣泛接受。
植物的組織培養(yǎng)是利用無(wú)性生殖原理，使植物組織在人工控制的條件下，通過(guò)細(xì)胞的增殖和分化，快速發(fā)育成新植株的高新技術(shù)手段。近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，植物組織培養(yǎng)技術(shù)已進(jìn)入生產(chǎn)應(yīng)用階段。利用這種技術(shù)，可以將植物的莖尖、葉片、莖段等切成小片，或用花藥、花粉等在無(wú)菌條件下，在玻璃器皿中人工配制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使它們發(fā)育成完整的植物體。利用植物組織培養(yǎng)的方法，只需要用少量植物材料，就可以在短期內(nèi)誘導(dǎo)出大量“試管苗”。
這種方法不僅繁殖速度快，受季節(jié)影響小，而且誘導(dǎo)變異也比較容易，為科研和生產(chǎn)帶來(lái)了很大方便。此外，由于植物的生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞分裂速度快，很少感染病毒。因此，采用莖尖培養(yǎng)還可以有效地脫去病毒，從而獲得更加健壯的植株。植物基因工程技術(shù)的發(fā)展也借助了植物組織培養(yǎng)技術(shù)。培養(yǎng)中的植物組織或細(xì)胞為外源基因的導(dǎo)入提供了便利；轉(zhuǎn)基因植物的實(shí)驗(yàn)室篩選和大量繁殖也離不開(kāi)植物的組織培養(yǎng)。由于植物的組織培養(yǎng)技術(shù)科技含量高，繁殖速度快，在農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)中已獲得廣泛應(yīng)用。
2）研究的目的與意義
隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，物質(zhì)文化生活水平的提高，我國(guó)城鄉(xiāng)園林綠化得到了飛速發(fā)展，這對(duì)美化生活、減少環(huán)境污染、改善生態(tài)環(huán)境起到了很大的促進(jìn)作用，但是，我們也應(yīng)該充分認(rèn)識(shí)到目前我國(guó)城市綠地建設(shè)中已存在不少問(wèn)題，城市園林植物種類(lèi)較為單一，城市生物多樣性建設(shè)受到影響，特別是地被植物材料嚴(yán)重匱乏，導(dǎo)致了草坪面積發(fā)展過(guò)大、用水量過(guò)多、養(yǎng)護(hù)費(fèi)用居高不下等問(wèn)題，影響了城鄉(xiāng)建設(shè)持續(xù)性發(fā)展。各級(jí)政府和組織對(duì)植物的種類(lèi)和品質(zhì)提出了更高的要求，迫切要求引進(jìn)能部分代替草坪、抗旱節(jié)水、管理費(fèi)用低和觀賞性強(qiáng)的優(yōu)質(zhì)地被植物，以豐富城市園林景觀，豐富生物多樣性，建設(shè)更接近自然的生態(tài)型城市。宿根花卉-大花萱草因其觀賞期長(zhǎng)、觀賞性高、適用性強(qiáng)、種類(lèi)豐富、群體功能強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)日益受到人們的重視，因而大花萱草的研究和利用面臨著一個(gè)良好的機(jī)遇和發(fā)展前景。
大花萱草（Hemerocallis hybrida），為百合科萱草屬多年生宿根草本植物。萱草屬植物全世界共約有15～18個(gè)種（中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì)，1980），主要分布于亞洲溫帶至亞熱帶地區(qū)，歐洲有少量分布，其中原產(chǎn)我國(guó)的就約有11種（北京林業(yè)大學(xué)園林系花卉教研組，1988），是世界上萱草屬植物種類(lèi)最多、分布最廣的國(guó)家。大花萱草主要用途是觀賞，因其具有既可觀花又可觀葉的雙重價(jià)值而廣泛用于切花、盆栽及園林綠化等。萱草花蕾可食用，根可入藥，集觀賞、食用、藥用于一身，是極為可貴的植物資源。
3）植物細(xì)胞全能性的表達(dá)
早在20世紀(jì)初，德國(guó)著名植物學(xué)家Haberlandt根據(jù)細(xì)胞學(xué)的理論就曾預(yù)言，植物細(xì)胞具有全能性（Totipotency）。也就是說(shuō)每個(gè)體細(xì)胞像胚胎細(xì)胞一樣，可以經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)成為一個(gè)完整的植株，這是因?yàn)橹参矬w的每個(gè)細(xì)胞都含有該個(gè)體的全部遺傳信息，都具有一套完整的基因組，因而具有在適宜條件下可以被誘導(dǎo)分化形成完整植株的潛在能力。直至20世紀(jì)50年代末科學(xué)家在胡蘿卜組織單細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子胚相似的結(jié)構(gòu)，其發(fā)育過(guò)程也與合子胚類(lèi)似，但由于它是從體細(xì)胞分化而來(lái)的因而稱(chēng)之為體細(xì)胞胚，并由此形成了再生植株，直到開(kāi)花結(jié)實(shí)。這一重大突破不僅證實(shí)了植物細(xì)胞的全能性，而且為細(xì)胞離體培養(yǎng)中研究形態(tài)發(fā)生機(jī)制開(kāi)拓了一個(gè)新的領(lǐng)域。近20余年，植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)得到了迅速發(fā)展，大量植物無(wú)論是二倍體細(xì)胞或單倍體性細(xì)胞以及原生質(zhì)體離體培養(yǎng)均可獲得再生植株。大量事實(shí)證明，植物體成熟組織中已高度分化的細(xì)胞液保留了回復(fù)到分生組織狀態(tài)的能力[6]。當(dāng)然，細(xì)胞能夠經(jīng)歷這一回復(fù)過(guò)程的程度是不同的，這主要取決于細(xì)胞所達(dá)到的發(fā)育上的、生理上的和細(xì)胞上的狀態(tài)。
【關(guān)鍵詞】大花萱草；擴(kuò)繁；分株；組織培養(yǎng)
0 前言
1）大花萱草無(wú)性繁殖技術(shù)研究狀況
�。�1）大花萱草簡(jiǎn)介
大花萱草根分為肉質(zhì)根和須根，肉質(zhì)根呈紡錘狀，須根多生長(zhǎng)在肉質(zhì)根上。具短根狀莖，葉翠綠狹長(zhǎng)，基生呈帶狀排成兩列�；ㄌ闹胁砍槌�，螺旋狀聚傘花序，每個(gè)花絮可著花數(shù)十朵�；ɡ偎启�，開(kāi)如漏斗，裂片翻卷，為百合形花冠，花瓣先端裂開(kāi)�；ū换亢仙释矤�，雄蕊6枚，3長(zhǎng)3短，花藥呈丁字形背著在花絲頂端，除藍(lán)色和純白色以外其余花色均有栽培品種�；◤阶兓螅ㄐ胃鳟�，花期從晚春一直到秋季。大多數(shù)品種的花只開(kāi)一天，但盛花期可以延續(xù)幾周甚至幾個(gè)月，有些品種單花壽命可超過(guò)24小時(shí)。蒴果，黑褐色、多棱形、有光澤，自然結(jié)實(shí)率低，但大部分品種不結(jié)實(shí)。
大花萱草抗旱能力強(qiáng)，耐高溫，抗低寒，適應(yīng)溫度范圍廣，在我國(guó)從南到北均可種植�？共⌒詮�(qiáng)，對(duì)土壤的適應(yīng)性廣，除過(guò)酸、過(guò)堿、過(guò)沙、過(guò)粘的土壤外一般都能栽培，PH值以6.5至7.5之間為好。
該類(lèi)花卉對(duì)堿性土具有特別的耐性，是油田及灘涂地帶不可多得的綠化材料�？捎脕�(lái)布置各式花壇、馬路隔離帶、疏林草坡等。亦可利用其矮生特性做地被植物。其中有數(shù)個(gè)品種為“冬青”型，種植在南國(guó)，可四季常綠，是優(yōu)秀的園林綠地花卉。
�。�2）繁殖方法
分株分割萱草叢塊是最常用的繁殖方法。該方法操作簡(jiǎn)單，植株容易存活，長(zhǎng)勢(shì)比較一致。分株可將母株叢全部挖出，重新分栽；或者是由母株叢一側(cè)挖出一部分植株做種苗，留下的繼續(xù)生長(zhǎng)。
分株多在春季萌芽前或秋季落葉后進(jìn)行。春季分株移栽，當(dāng)年即可抽苔開(kāi)花；秋季分株移栽，翌年才能抽苔開(kāi)花。移栽時(shí)應(yīng)選用生長(zhǎng)旺盛、花蕾多、品質(zhì)好、無(wú)病蟲(chóng)害的植株。
分株時(shí)挖取株叢的一部分分蘗作為種苗，挖取部分要帶根，從短縮莖處割開(kāi)，將老根、朽根和病根剪除，盡量保留肉質(zhì)根，適當(dāng)剪短（約留10厘米）后即可栽植。栽植應(yīng)選在晴天進(jìn)行，邊挖苗，邊分苗，邊栽苗，盡量少傷根，這樣緩苗快。一般2-3年分株一次，以保證植株旺盛的生長(zhǎng)勢(shì)。
組培用幼嫩葉片、花絲和花苔等器官培養(yǎng)成植株。方法是先誘導(dǎo)幼嫩器官產(chǎn)生愈傷組織，然后用適當(dāng)培養(yǎng)基在適宜的溫濕光氣等條件下培養(yǎng)成幼小植株。再將小苗假植于營(yíng)養(yǎng)缽，經(jīng)一段時(shí)間培養(yǎng)成植株幼苗，之后定植。但這種方法還沒(méi)有被廣泛接受。
植物的組織培養(yǎng)是利用無(wú)性生殖原理，使植物組織在人工控制的條件下，通過(guò)細(xì)胞的增殖和分化，快速發(fā)育成新植株的高新技術(shù)手段。近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，植物組織培養(yǎng)技術(shù)已進(jìn)入生產(chǎn)應(yīng)用階段。利用這種技術(shù)，可以將植物的莖尖、葉片、莖段等切成小片，或用花藥、花粉等在無(wú)菌條件下，在玻璃器皿中人工配制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使它們發(fā)育成完整的植物體。利用植物組織培養(yǎng)的方法，只需要用少量植物材料，就可以在短期內(nèi)誘導(dǎo)出大量“試管苗”。
這種方法不僅繁殖速度快，受季節(jié)影響小，而且誘導(dǎo)變異也比較容易，為科研和生產(chǎn)帶來(lái)了很大方便。此外，由于植物的生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞分裂速度快，很少感染病毒。因此，采用莖尖培養(yǎng)還可以有效地脫去病毒，從而獲得更加健壯的植株。植物基因工程技術(shù)的發(fā)展也借助了植物組織培養(yǎng)技術(shù)。培養(yǎng)中的植物組織或細(xì)胞為外源基因的導(dǎo)入提供了便利；轉(zhuǎn)基因植物的實(shí)驗(yàn)室篩選和大量繁殖也離不開(kāi)植物的組織培養(yǎng)。由于植物的組織培養(yǎng)技術(shù)科技含量高，繁殖速度快，在農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)中已獲得廣泛應(yīng)用。
2）研究的目的與意義
隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，物質(zhì)文化生活水平的提高，我國(guó)城鄉(xiāng)園林綠化得到了飛速發(fā)展，這對(duì)美化生活、減少環(huán)境污染、改善生態(tài)環(huán)境起到了很大的促進(jìn)作用，但是，我們也應(yīng)該充分認(rèn)識(shí)到目前我國(guó)城市綠地建設(shè)中已存在不少問(wèn)題，城市園林植物種類(lèi)較為單一，城市生物多樣性建設(shè)受到影響，特別是地被植物材料嚴(yán)重匱乏，導(dǎo)致了草坪面積發(fā)展過(guò)大、用水量過(guò)多、養(yǎng)護(hù)費(fèi)用居高不下等問(wèn)題，影響了城鄉(xiāng)建設(shè)持續(xù)性發(fā)展。各級(jí)政府和組織對(duì)植物的種類(lèi)和品質(zhì)提出了更高的要求，迫切要求引進(jìn)能部分代替草坪、抗旱節(jié)水、管理費(fèi)用低和觀賞性強(qiáng)的優(yōu)質(zhì)地被植物，以豐富城市園林景觀，豐富生物多樣性，建設(shè)更接近自然的生態(tài)型城市。宿根花卉-大花萱草因其觀賞期長(zhǎng)、觀賞性高、適用性強(qiáng)、種類(lèi)豐富、群體功能強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)日益受到人們的重視，因而大花萱草的研究和利用面臨著一個(gè)良好的機(jī)遇和發(fā)展前景。
大花萱草（Hemerocallis hybrida），為百合科萱草屬多年生宿根草本植物。萱草屬植物全世界共約有15～18個(gè)種（中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì)，1980），主要分布于亞洲溫帶至亞熱帶地區(qū)，歐洲有少量分布，其中原產(chǎn)我國(guó)的就約有11種（北京林業(yè)大學(xué)園林系花卉教研組，1988），是世界上萱草屬植物種類(lèi)最多、分布最廣的國(guó)家。大花萱草主要用途是觀賞，因其具有既可觀花又可觀葉的雙重價(jià)值而廣泛用于切花、盆栽及園林綠化等。萱草花蕾可食用，根可入藥，集觀賞、食用、藥用于一身，是極為可貴的植物資源。
3）植物細(xì)胞全能性的表達(dá)
早在20世紀(jì)初，德國(guó)著名植物學(xué)家Haberlandt根據(jù)細(xì)胞學(xué)的理論就曾預(yù)言，植物細(xì)胞具有全能性（Totipotency）。也就是說(shuō)每個(gè)體細(xì)胞像胚胎細(xì)胞一樣，可以經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)成為一個(gè)完整的植株，這是因?yàn)橹参矬w的每個(gè)細(xì)胞都含有該個(gè)體的全部遺傳信息，都具有一套完整的基因組，因而具有在適宜條件下可以被誘導(dǎo)分化形成完整植株的潛在能力。直至20世紀(jì)50年代末科學(xué)家在胡蘿卜組織單細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子胚相似的結(jié)構(gòu)，其發(fā)育過(guò)程也與合子胚類(lèi)似，但由于它是從體細(xì)胞分化而來(lái)的因而稱(chēng)之為體細(xì)胞胚，并由此形成了再生植株，直到開(kāi)花結(jié)實(shí)。這一重大突破不僅證實(shí)了植物細(xì)胞的全能性，而且為細(xì)胞離體培養(yǎng)中研究形態(tài)發(fā)生機(jī)制開(kāi)拓了一個(gè)新的領(lǐng)域。近20余年，植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)得到了迅速發(fā)展，大量植物無(wú)論是二倍體細(xì)胞或單倍體性細(xì)胞以及原生質(zhì)體離體培養(yǎng)均可獲得再生植株。大量事實(shí)證明，植物體成熟組織中已高度分化的細(xì)胞液保留了回復(fù)到分生組織狀態(tài)的能力[6]。當(dāng)然，細(xì)胞能夠經(jīng)歷這一回復(fù)過(guò)程的程度是不同的，這主要取決于細(xì)胞所達(dá)到的發(fā)育上的、生理上的和細(xì)胞上的狀態(tài)。
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